western blot 可以用小牛血清稀释一抗吗之前都是用抗体稀释液稀释一抗,用小牛血清稀释二抗.一抗是兔来源,二抗是山羊抗兔.今天配一抗没注意,用了小牛血清,请问会有什么影响?

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/29 13:20:03
western blot 可以用小牛血清稀释一抗吗之前都是用抗体稀释液稀释一抗,用小牛血清稀释二抗.一抗是兔来源,二抗是山羊抗兔.今天配一抗没注意,用了小牛血清,请问会有什么影响?

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western blot 可以用小牛血清稀释一抗吗
之前都是用抗体稀释液稀释一抗,用小牛血清稀释二抗.一抗是兔来源,二抗是山羊抗兔.今天配一抗没注意,用了小牛血清,请问会有什么影响?

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如果你从前没用错的时候最终结果一直不错的话（信号较强,条带清晰）,这次用错了,影响不大,甚至看不出区别.我估计哦.
你提到的“抗体稀释液”,既然只是个名字,没有提到成分,估计你是买的商品化的东东,你可以了解一下它的成分,一般也含BSA或donkey/goat serum,或者脱脂milk powder.原理上都是一样的都是用蛋白封闭非特异集合位点,只是不同实验室的传统不太一样,没有本质区别的.
另外,有人总是把BSA（bovine serum albumin）和bovine serum弄混,二者也是有区别的.我估计你提到的“小牛血清”应该是指BSA而不是血清.前者是后者的一类成分,更单纯.
当然,你从前一直按“用抗体稀释液稀释一抗,用小牛血清稀释二抗“这么做,以后还是要恢复过来,保持实验的一致性吧,尤其是要不同实验组之间的定量比较的话,还是保持条件稳定性比较好,（尤其是没有内参的半定量比较）.这一次不必灰心,继续做下去,定性上应该不会有大区别的,就是说该有的条带还是会有的.

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