求提取毒种RNA方法新手初来乍到,实验要求进行毒种基因测序,我购买了TAKARA公司的miniBEST viral DNA/RNA EXtraction kit ver4.0试剂盒提取毒种RNA,毒种滴度在5.0-6.3之间,提取后保存在零下70度三天,后送测

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/03 22:17:50
求提取毒种RNA方法新手初来乍到,实验要求进行毒种基因测序,我购买了TAKARA公司的miniBEST viral DNA/RNA EXtraction kit ver4.0试剂盒提取毒种RNA,毒种滴度在5.0-6.3之间,提取后保存在零下70度三天,后送测

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求提取毒种RNA方法
新手初来乍到,
实验要求进行毒种基因测序,我购买了TAKARA公司的miniBEST viral DNA/RNA EXtraction kit ver4.0试剂盒提取毒种RNA,毒种滴度在5.0-6.3之间,提取后保存在零下70度三天,后送测序公司,测序公司要求加乙醇后送检,但送到后,对方表示没有得到沉淀RNA.
因为我们公司局限,送检时没有电泳先检测,所以我也不知道是我没提出来,还是路上降解了,有什么好的方法提取毒种RNA.

求提取毒种RNA方法新手初来乍到,实验要求进行毒种基因测序,我购买了TAKARA公司的miniBEST viral DNA/RNA EXtraction kit ver4.0试剂盒提取毒种RNA,毒种滴度在5.0-6.3之间,提取后保存在零下70度三天,后送测
异硫氰酸胍提取法(这是提禽流感病毒的详细步骤,供参考)
1、取200ul样品数+阴性对照+阳性对照加入1.5ml灭菌eppendorf管;
2、加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀;
3、13000rpm离心15min;
4、在第3步离心快结束时,另取同样多eppendorf管,加入400ul于-20℃预冷的异丙醇;
5、取第3步离心的上清(一定不要吸取到中间白色层,第3步离心结束往外拿的时候,管子尽量不要倾斜)转移到第4步准备的管中,颠倒混匀;
6、13000rpm离心15min,轻轻倒去上清,在吸水纸上尽量沾干液体;
7、加600ul75%乙醇,颠倒数次以洗涤残存异丙醇;
8、13000rpm离心15min,轻轻倒去上清,在吸水纸上尽量沾干液体;
9、4000rpm离心10sec,将管壁残存液体甩到底部,用微量枪头吸干,室温干燥2-3min(不可过分干燥,防止下一步RNA不溶解);
10、加入20ulDEPE水(加入depc的纯水高压后的水即为DEPE水),轻轻混匀溶解RNA.2000rpm离心5sec,冰上保存备用(最好2小时内使用,以免RNA降解).

求提取毒种RNA方法新手初来乍到,实验要求进行毒种基因测序,我购买了TAKARA公司的miniBEST viral DNA/RNA EXtraction kit ver4.0试剂盒提取毒种RNA,毒种滴度在5.0-6.3之间,提取后保存在零下70度三天,后送测 提取RNA反转录测序的问题小弟要提取RNA做反转录对抗一种酶的基因进行测序,因为是新手,以前没有接触过此类实验,求从提取RNA开始到测序的实验步骤,越详细越好,先谢过! 几种提取RNA的方法 ctab法提rna求提取液的配置方法 RNA的提取方法是什么? 请问哪种方法提取植物RNA效果比较好 RNA的提取方法有哪些 提取昆虫RNA有哪些方法? 动物肝细胞中DNA和RNA的提取和鉴定实验的有关意见PCR是DNA扩增技术,跟我们的实验关系不是很大.我们的实验只是要提取出动物肝细胞中的DNA和RNA及通过实验的方法来测定其中的含量. 质粒提取实验中,RNA酶一般处理多久啊?我现在要提取高浓度高纯度的质粒,用的是酚氯仿抽提的方法,为了出去蛋白质和RNA的影响 我加完溶液1、2、3以后离心取上清,直接加了RNA酶,再用酚氯仿抽 生化实验中,酵母RNA的提取和组分鉴定要注意的问题? 求TRIZOL提取RNA的详细步骤 求分析rna的提取电泳图 哪种蝎子可以提取蝎毒 现在要做实验,实验内容是用一种化学物质对体外细胞进行攻毒实验.想问一下具体的细胞攻毒的实验方法. 磁珠法提取基因组DNA实验中如何除去RNA? 在磁珠法提取基因组DNA实验中如何除去RNA? RNA的提取和反转录的实验步骤?