作业帮在反相高效液相色谱法中,柱子牌子不同杂质峰出峰顺序为什么不一样?在反相高效液相色谱法中,我使用安捷伦的C18柱子分析样品,有三个杂质峰,第二个杂质峰是最大的,而换用迪马或者月旭的
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/05 10:24:47
在反相高效液相色谱法中,柱子牌子不同杂质峰出峰顺序为什么不一样?在反相高效液相色谱法中,我使用安捷伦的C18柱子分析样品,有三个杂质峰,第二个杂质峰是最大的,而换用迪马或者月旭的
在反相高效液相色谱法中,柱子牌子不同杂质峰出峰顺序为什么不一样?
在反相高效液相色谱法中,我使用安捷伦的C18柱子分析样品,有三个杂质峰,第二个杂质峰是最大的,而换用迪马或者月旭的柱子,第三个峰是最大的?柱子填料应该是一样的吧,怎么会有这种情况呢?请指教!
在反相高效液相色谱法中,柱子牌子不同杂质峰出峰顺序为什么不一样?在反相高效液相色谱法中,我使用安捷伦的C18柱子分析样品,有三个杂质峰,第二个杂质峰是最大的,而换用迪马或者月旭的
这种情况有时虽然和理论不太相符,但也是正常的.对于是液相色谱的保留机理,至今还没有完全的搞清楚,相似相溶还是目前使用较多的分离理论.但事实上,样品的柱子里的分离情况的确是非常复杂的,有样品本身性质,流动相性质,还有柱子性质,还有气泡影响等.
举个简单的例子吧,苯,甲苯,乙苯,二甲苯,这些物质出峰顺序是怎么样的呢?会不会按极性顺序出峰?它们有极性吗?其实这些物质还是有极性的,只是相对于是谁而言,那同样,C18色谱柱,表面看起来是非极性的,其实,C18色谱柱真正键合上的C18只占非常少的量,大 部分会是OH等极性基团,只是在保留的时候,C18起了好大的作用.不同厂家的色谱柱,键合的技术上有差异,那键合的比例也不完全一样,再加上非常复杂的分离作用,所以不同品牌的柱子出峰有时顺序不一样,也正常.还有一种情况,就是在液相色谱梯度洗脱时也会出现出峰顺序的改变的情况,这也是正常的,因为流动相改变的极性及分离因素.
当然了,这种顺序颠倒的情况基本都是发生在两峰非常接近的情况了,出峰离的比较远（极性差的大）基本不会发生这样的情况的.
还有一点就是,不能光看峰的大小就确定是峰的顺序改变了,要进行仔细的确认才行.