作业帮如何把导入了目的基因的受体细胞筛选出来?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/28 04:51:10
如何把导入了目的基因的受体细胞筛选出来?
如何把导入了目的基因的受体细胞筛选出来?
如何把导入了目的基因的受体细胞筛选出来?
导入时用的运载体上如果有抗性基因（标记基因）,就可以通过检测抗性基因的表达来检测,比如运载体PBR322 就带有抗四环素基因和抗氨卞青霉素基因
要么就等目的基因在受体细胞中表达以后,然后根据特定的性状来区分
常见的几种筛选方法如下
1．抗生素筛选法 菌株为某种抗生缺陷型， 而质粒上带有该抗性基因（如氨苄青霉素， 卡拉霉素等）这样只有转化子才能在含该抗生素的培养基上长出。
2互补法
现在使用的许多载体（如PUC系列）有含有一个大肠杆菌DNA的短区段，其中含有β－半乳糖苷酸基因（lacZ）的调控序列和头146个氨基酸偏码区。这个偏码区中插入一个多克隆位点。
受体菌则...
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常见的几种筛选方法如下
1．抗生素筛选法 菌株为某种抗生缺陷型， 而质粒上带有该抗性基因（如氨苄青霉素， 卡拉霉素等）这样只有转化子才能在含该抗生素的培养基上长出。
2互补法
现在使用的许多载体（如PUC系列）有含有一个大肠杆菌DNA的短区段，其中含有β－半乳糖苷酸基因（lacZ）的调控序列和头146个氨基酸偏码区。这个偏码区中插入一个多克隆位点。
受体菌则含编码β－半乳糖苷酶C端aa的序列。当外源基因插入时，二者溶为一体后，有β－半乳糖苷酶表达， 在生色底物5－溴－4－氯－3－吲哚－β－D－半乳糖苷（x-gal）培养基中形成兰色菌落。
而当有外源基因插入到多克隆原点，从而造成插入失活，而使lacZ基因不表达而形成白色菌斑。 通过颜色不同而区分重组子和非重组子。
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动物？植物？微生物？都没说清楚啊
如果是微生物，带有抗生素筛选标记基因的话，可以用筛选剂筛选，未导入的死掉，转基因的存活；如果有lacZ基因，可以用蓝白斑筛选。
如果是动物细胞，带有荧光标记的话，可以在紫外灯下，用显微操作仪吸取出来，或者用流式细胞仪分离。
如果是植物细胞，就困难了，如果是悬浮细胞的话，也可以用流式细胞仪分离。...
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动物？植物？微生物？都没说清楚啊
如果是微生物，带有抗生素筛选标记基因的话，可以用筛选剂筛选，未导入的死掉，转基因的存活；如果有lacZ基因，可以用蓝白斑筛选。
如果是动物细胞，带有荧光标记的话，可以在紫外灯下，用显微操作仪吸取出来，或者用流式细胞仪分离。
如果是植物细胞，就困难了，如果是悬浮细胞的话，也可以用流式细胞仪分离。
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用同样的限制性内切酶再切出来就行啦，粘性末端是没有变啊。
再用DNA连接酶把原来的两端连起来就可以了啊。