单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/05 18:59:40
单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀

单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀
单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀

单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀
如果PCR系统没有问题,很可能是质粒和染色体发生了重组.建议提细菌的genome DNA 做一次PCR.如果是阳性,就说明是这样.
另外,还可以另挑几个菌落,重新提质粒扩增.

每次都这样吗?是不是质粒PCR体系有问题呀?

挑斑的时候污染到其他菌落了,重新挑斑,再验证。

单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀 我的目的片段连载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR,没有条带. 我的单克隆菌落PCR除了很明确的目的条带外.在2000多上面还有微弱的两条带.不知道是什么条带.难道是菌的DNA?这样的情况下我能送去测序吗?有经验的朋友帮忙解释下呗.没分.很穷. 转化后菌液pcr有目的条带,然后提质粒和双酶切验证.但是没有得到目的条带.1.提质粒最后一步用的是elution buffer而不是水,这样有什么影响,如果有影响,现在如何补救?2.28a空质粒的位置应 PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带 PCR跑出的条带与目的条带不同怎么办 菌落pcr假阳性如图,菌落pcr,2-6道扩增0.9kb目的条带,7-12扩增1.0kb目的条带.7,8道扩增的1.0kb有点偏离,9道为非特异性扩增,12道在1.0kb位置有隐约条带,是否为非特异性扩增?mark跑直线,而条带两端上扬 普通PCR加模板和不加模板的两组在相同位置有带,但是都没有目的条带,什么原因 请问谁有PCR扩增目的条带 连接 转化的具体步骤呀 RT PCR只跑出内参的条带,没有目的基因,原因有哪些? 如何消除PCR的拖尾PCR扩增出来有目的条带,但是有拖尾,呈弥散片 在含卡那的培养板和培养基中都长,菌液PCR也有,就是提不出来质粒用pET30a构建原核表达载体,连接产物转化,长了满板,条单克隆到含卡那的液体培养基中,长了,菌液PCR有条带,但提质粒提不出来 菌液PCR的时候能P出目的条带,为什么测序却完全不正确? [菌液PCR,测序,DNA提取,求助]菌液PCR的时候能P出目的条带,为什么测序却完全不正确? 菌液pcr检测目的条带很明显但是有弱杂带是怎么回事 pcr扩增时出现多条带,目的条带很亮,多余的带比目的条带大,是怎么回事 PCR有扩出来条带,但目的条带不是太亮就有什么原因 PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常.