什么是活体染色,其原理、方法步骤

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/04 12:26:32

什么是活体染色,其原理、方法步骤
什么是活体染色,其原理、方法步骤

什么是活体染色,其原理、方法步骤
定义
活体染色是利用某些无毒或毒性很小的染料来显示细胞内某些天然结构,而不影响细胞的生命活动或产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡.
基本原理
　　一般的生物材料不能穿透细胞膜,只有当细胞被固定后,细胞膜被破坏,染料才能进入细胞内部.但是,有一些染料（称“活体染料”）却能进入活细胞,它们是一些无毒或毒性很小的染色剂,能使细胞中某些特定结构着色.活体染料基本上不影响或很少影响细胞的生命活动.
活体染料多为碱性染料,如中性红、健那绿、次甲基蓝、甲苯胺蓝、亮焦油紫等,它们解离后带正电,其中有的染料与胞内某些结构有专一性接合.例如,中性红染液泡系,健那绿染线粒体.
实验步骤
1、活细胞的检测一：台盼蓝排除法
取一滴细胞悬液,与一滴2%台盼蓝溶液混合,放盖玻片,静置3分钟,显微镜下观察染色情况.活细胞不着色,死细胞呈蓝色.计算活细胞的百分比.
2、活细胞的检测二：中性红法
1）在小离心管中,用Hanks液对1%中性红水溶液作10倍稀释,1500rpm离心7分钟,取上清液置另一干净的离心管中作为染色液.
2）将细胞悬液与染液4：1混合,混匀后加盖玻片静置15-20分钟.
3）显微镜观察染色情况.死细胞不着色,活细胞可吸收中性红溶液而呈红色.

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