原位杂交的探针包括哪些

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/05 00:58:22
原位杂交的探针包括哪些

原位杂交的探针包括哪些
原位杂交的探针包括哪些

原位杂交的探针包括哪些
各类探针制备如下:①DNA探针.通过随机引物标记法掺入荧光素标记的dUTP制备DNA探针.荧光素标记的dUTP也可通过切口平移法和PCR反应掺入DNA探针.②寡聚核苷酸探针.于寡聚核苷酸3′端加上一段由荧光素标记的dUTP短尾便成探针.反应产生的短尾具有较高灵敏度而又不影响杂交的严格性.③RNA探针.通过使用RNA聚合酶和含有对RNA聚合酶专一性的启动子构建成的质粒(或其他合适的质粒)来制备RNA探针.这一质粒作模板,以双链的形式供应,聚合酶仅能对其中的一条链进行转录产生单链RNA.如果使用的质粒在克隆的模板序列的两条链上均带有启动子,由此产生的反义链探针可与mRNA杂交,而正义链探针不应显示杂交信号,故可作为对照,证明杂交近程的专一性.

DNA探针、寡聚核苷酸探针、RNA探针

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