Easy-T-vector 与蓝白筛选我用买来的Easy-T-vector直接转化DH5a,在IPTG-X-gal平板上只有白色菌落,无蓝色菌落.这个现象正常吗?是不是因为这个载体因末端多出T,无法自连为环状,所以LacZ基因中断无法正

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 23:06:56
Easy-T-vector 与蓝白筛选我用买来的Easy-T-vector直接转化DH5a,在IPTG-X-gal平板上只有白色菌落,无蓝色菌落.这个现象正常吗?是不是因为这个载体因末端多出T,无法自连为环状,所以LacZ基因中断无法正

Easy-T-vector 与蓝白筛选我用买来的Easy-T-vector直接转化DH5a,在IPTG-X-gal平板上只有白色菌落,无蓝色菌落.这个现象正常吗?是不是因为这个载体因末端多出T,无法自连为环状,所以LacZ基因中断无法正
Easy-T-vector 与蓝白筛选
我用买来的Easy-T-vector直接转化DH5a,在IPTG-X-gal平板上只有白色菌落,无蓝色菌落.这个现象正常吗?是不是因为这个载体因末端多出T,无法自连为环状,所以LacZ基因中断无法正常表达?所以无论连接是否成功,都只有白斑没蓝斑.如果这样,为何产品说明书上还说可以做蓝白筛选?

Easy-T-vector 与蓝白筛选我用买来的Easy-T-vector直接转化DH5a,在IPTG-X-gal平板上只有白色菌落,无蓝色菌落.这个现象正常吗?是不是因为这个载体因末端多出T,无法自连为环状,所以LacZ基因中断无法正
线性化的T-载体末端多出T,无法自连为环状,你用线性化的T-载体直接转化DH5a,T-载体进入细胞后仍然是线性的,所以质粒无法编码β-半乳糖苷酶N端的146个氨基酸,也就不能形成a-互补,所以形成白斑.但形成的白斑应该很少,因为线性化的质粒导入细胞是比较困难的.这一点是正常的.你的理解也很正确.
为何产品说明书上说可以做蓝白斑筛选呢?
因为我们用T-载体都是同外源基因连接后才导入细胞的,切线性化质粒很难导入细胞,所以几乎可以认为在IPTG-X-gal平板上出现白斑的就是阳性克隆(并非百分百是),所以说明书上也就这么说了.

Easy-T-vector 与蓝白筛选我用买来的Easy-T-vector直接转化DH5a,在IPTG-X-gal平板上只有白色菌落,无蓝色菌落.这个现象正常吗?是不是因为这个载体因末端多出T,无法自连为环状,所以LacZ基因中断无法正 T vector 和 T easy vector 的区别Thank you! 蓝白筛选原理? 如何实现蓝白筛选 蓝白斑筛选 如何制备用于蓝白筛选的培养基? 基因工程中的α互补和蓝白筛选的原理 感受态细胞涂平板 什么菌落都没有长出来 做克隆实验,目的基因与pGEM-T Easy Vector连接后,和JM109感受态细胞培养,然后培养液在LB+氨卞青霉素+IPTG+X-Gal培养基上37度培养,结果没有长出来任何菌落. 蓝白斑筛选 没有白斑我的蓝白斑筛选,做好了,之后为什么只有蓝斑,没有白斑呢?郁闷那您看,我是不是应该把连接体系变一下呢? 蓝白筛选只有白斑我所做的蓝白筛选完全按照试剂盒所述来做的,X-GAL也是新配制的,并且严格避光保存了,为什么做出来一个蓝色的斑都没有呢?IPTG加了,前几天做的时候还是有蓝斑的 蓝白筛选,没有x-gal和IPTG如何筛选题目意思是原来准备做蓝白筛选,但是等到需要x-gal和IPTG时发现没有了,问还能继续筛选吗?老师给的提示是能够筛选,求怎么筛选? 为什么蓝白筛选时,筛选出的白色菌落要将进一步鉴定?哪些方法能确认阳性克隆?为什么白色菌斑还要鉴定 蓝白斑筛选假阴性为什么蓝白斑筛选会出现假阴性 正则表达式,与或怎么写?比如有文本 t.txt 内容:123 abc456 def789 ghi012 jkl我要筛选出含有 789 和 jkl 的行,怎么写?cat t.txt | grep 蓝白斑筛选培养基怎么配啊?新手 请问IPTG如何配置?AT克隆蓝白斑筛选用 关于C++中vector< vector >的含义.vector< vector > vvec;的意思是:定义了一个vector,这个vector的element也是一个vector,那么我要问的是,对于内层的vector,编译系统知道每个element的size为sizeof(int),而对于外层 筛选菌种请问如何筛选白地霉与黑曲霉